2012_13
Guia docent 
Facultat d'Enologia
A A A 
català 
 
 
Biotecnologia (2005)
 Assignatures
  ENGINYERIA GENÈTICA MOLECULAR
   Continguts
Tema Subtema
1. Introducció. Introducció a l’enginyeria genètica. Recordatori de conceptes bàsics: clonatge; DNA recombinant; vectors i endonucleases de restricció; incorporació de DNA a l’hoste, tècniques bàsiques.
2. Vectors: Plasmidis i bacteriòfags. Recordatori de les característiques bàsiques dels vectors plasmidis i bacteriòfags. Selecció. Millora dels vectors bàsics. Plasmidis pBR322 i pUC. Vectors derivats del fag lambda d’inserció i de substitució. Vectors derivats de fags filamentosos: fag M13.
3. Altres vectors. Fasmidis i fagèmids. λZAP. Cosmidis. Vectors derivats del fag P1. BACs derivats del factor F. Altres vectors (vectors d’expressió, vectors regulables...).
4. Modificació i expressió de gens clonats. Mutagènesis dirigida. Mètodes : rèplica d’heterodúplex, primer extension, mutagènesis amb PCR. Enginyeria de proteïnes : evolució dirigida i gene shuffling. “Phage display”. Cell surface Display.
5. Clonatge en llevats. Clonatge en S. Cerevisiae. Vectors: vectors d’integració cromosòmica (YIp) i vectors de replicació autònoma (YEp, YRp, YCp, YAC). Introducció de DNA en llevats. Expressió de proteïnes recombinants. Yeast cell surface display. Aplicacions: Yeast Two Hybrid.
6. Enginyeria genètica en sistemes vegetals. Vectors i estratègies d’insersió de DNA en l’hoste: plasmidis Ti i infecció per Agrobacterium tumefaciens; plasmidis Ri; introducció directa de DNA: bombardejament de microprojectils, ús de protoplasts; vectors vírics. Cultius vegetals in vitro. Exemples.
7. Transferència de gens a cèl•lules animals. Estratègies de transfecció. Marcadors de selecció. Transfecció transtòria i estable. Sistemes d’expressió: vectors bacterians i vectors vírics.
8. Animals transgènics. Mètodes. Transgènesi mitjançant cèl•lules ES. Aplicacions.