2014_15
Guía docente 
Facultad de Química
A A A 
castellano 
Grado de Bioquímica y Biología Molecular (2009)
 Asignaturas
  METODOLOGÍA Y EXPERIMENTACIÓN EN BIOCIENCIES MOLECULARES I
   Contenidos
tema Subtema
1. Clonación del cDNA de un gen humano en un vector de expresión de la levadura S. cerevisiae. 1. Aislamiento de RNA total de células humanas HepG2
2. Retrotranscripción de mRNA a ss-cDNA
3. Amplificación de la parte codificante del MT2A por PCR.
4. Restricción del producto de PCR con enzimas de restricción.
5. Ligación del producto de PCR con el vector pYES2.
6. Transformación de E.coli con la mezcla de ligación y selección de bacterias transformados.
7. Selección de colonias con plásmido recombinante por PCR de colonias.
8. Minipreparació de DNA plasmídico de E. coli.
9. Comprobación de los plásmidos recombinantes por análisis de restricción.
2. Clonación de genes del fago Lambda en un vector de propagación de E.coli 1. Restricción del DNA del fago Lamba
2. Ligación de fragmentos de restricción con el vector pUC19
3. Transformación de E.coli con la mezcla de ligación y selección de bacterias transformados.
4. Identificación de colonias de E. coli portadoras de plásmido recombinante por color (blanco / azul).
5. Minipreparació de DNA plasmídico de E. coli.
6. Comprobación de los fragmentos y nada del fago Lambda clonados en pUC19 para análisis de restricción.